使用手册（目录号：KINGBIO-1426）
1 试剂盒概述：
本试剂盒的KINGBIO S4感受态细胞具有链霉素抗性，携带lacZΔM15基因，可以用于蓝白斑筛选。并且对于分子量较大以及易发生重组的具有重复序列的质粒进行了优化，可以有效的防止质粒上片段的丢失。其经特殊工艺处理得到的感受态细胞，效率可达5×107，-70℃保存数月仍然可以保持转化效率。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。
2 本试剂盒内容：
KINGBIO S4感受态大肠杆菌
阳性对照质粒
3 保存条件：
－70℃
4 试剂盒以外需准备
SOC或者LB
5 实验方法与流程：
5.1 将-70℃下保存的感受态细胞置于冰上，完全解冻后轻轻地将细胞均匀悬浮。
注：一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 µl，可以根据实际情况分装使用。
5.2 将待转化的质粒或者连接反应物加入至感受态中，轻轻混匀，冰浴30 分钟。
注：带转化质粒或连接反应物不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100 µl 感受态细胞为例。
5.3 向每个离心管中加入 900 µl 无菌的 SOC 或LB 培养基（不含抗生素），混匀后置于 37℃摇床振荡培养 45 分钟（150转/分钟），目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5.4 室温下4000rpm离心5分钟，用枪头吸弃800µl上清液，用剩余的培养基将细胞悬浮。
5.5 将悬浮菌体涂布于一个90mm LB平板中（抗性依质粒或者连接产物而定）。
5.6 倒置平板, 37℃培养12-16h。
6 注意事项与常见问题
6.1 感受态细胞应保存在 -70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。
6.2 进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
6.3 为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
