君伯生物

君伯生物提供全流程荷瘤小鼠动物实验解决方案

 一、免疫缺陷小鼠的选择

    免疫缺陷小鼠荷瘤实验常用于肿瘤及药物研究。常用的免疫缺陷小鼠有裸鼠（Nude mice）,NOD/SCID小鼠，NSG小鼠等。裸鼠胸腺发育缺陷，因而体内缺乏成熟的T淋巴细胞，但B淋巴细胞，NK细胞与巨噬细胞的功能基本正常。NOD/SCID小鼠由于Prkdc基因突变，无法完成T细胞受体与B细胞受体的V(D)J的重排，因此体内缺乏成熟的T淋巴细胞与B淋巴细胞，但NK细胞与巨噬细胞的功能正常。NSG小鼠则是在NOD/SCID的基础上，又敲除了IL-2Ry基因，体内缺乏T淋巴细胞、B淋巴细胞与NK细胞，巨噬细胞的功能也发生缺陷。因此，这三种免疫缺陷小鼠中，裸鼠的免疫缺陷程度最低，对外来细胞的耐受最差；NOD/SCID小鼠次之；NSG小鼠的免疫缺陷程度最高，人肿瘤组织或肿瘤细胞的耐受最好。因此，如果研究者对荷瘤实验的要求较低，使用的肿瘤组织或肿瘤细胞成瘤性较强，裸鼠可以满足多数的荷瘤实验的需求；但如果对荷瘤实验的要求较高，使用的肿瘤组织或肿瘤细胞成瘤性较弱，则应该考虑使用NOD/SCID小鼠或NSG小鼠进行荷瘤实验。

不同的肿瘤组织或肿瘤细胞，在免疫缺陷小鼠体内的成瘤能力不尽相同。对于成瘤能力未知的细胞系，研究者需要在不同免疫缺陷程度的小鼠中，接种梯度剂量的组织或细胞，以观测其的成瘤能力。临床获得的肿瘤活组织，可以移植到免疫缺陷小鼠中，构建PDX模型，用于抗肿瘤药物的测试。肿瘤组织来源、肿瘤恶性程度都会影响其成瘤能力，研究者需要在免疫缺陷程度较高的小鼠（NOD/SCID或NSG小鼠）中，对肿瘤组织的成瘤性进行测试。

病人来源的肿瘤组织或肿瘤细胞移植到免疫缺陷小鼠中所制备的荷瘤小鼠是肿瘤药物研究的重要工具。君伯生物提供多种人肿瘤细胞系荷瘤（Cell line derived xenografts, CDX）小鼠模型，以及人原代肿瘤组织荷瘤（Patient derived xenografts, PDX）小鼠模型。同时，君伯生物还提供针对特定病人肿瘤样本的化疗药物测试服务。

二、君伯生物提供的CDX小鼠模型：

三、君伯生物提供的PDX小鼠模型

 利用来源于病人肿瘤样本的PDX小鼠模型，由于携带有病人肿瘤一致的基因突变，以及与病人肿瘤一致的病理组织结构，因此PDX小鼠模型对抗肿瘤药物的反应与病人的反应更加一致，因此PDX模型在个性化肿瘤药物测试研究更具优势。由于NOD/SCID小鼠与NSG小鼠免疫缺陷程度较高，因此常用于PDX小鼠模型的构建。

构建PDX模型，需要用到手术获得的新鲜的肿瘤组织。肿瘤组织通过机械剪切处理成1cm³的组织块，然后移植到免疫缺陷小鼠的皮下或特定的组织。组织块移植能够保持肿瘤组织中的细胞间相互作用与肿瘤组织内部微环境，而且成瘤性较好，因此应用更为广泛。与原发癌相比，转移癌组织更容易构建PDX小鼠模型。肿瘤组织块还可以加胶原酶继续消化成单细胞悬液，然后在移植到免疫缺陷小鼠的皮下或特定的组织。

肿瘤组织可以移植到免疫缺陷小鼠的皮下或者特定组织。皮下移植操作简单，而且容易对肿瘤得生长状况进行检测，因此应用比较广泛。特定组织移植操作相对复杂，往往需要利用体内成像设备对肿瘤生长状况的进行检测，往往成本较高。

PDX小鼠的肿瘤可以进行连续移植，来源于病人的肿瘤称为F0代，第一轮PDX小鼠获得的肿瘤称为F1代，依次类推。一般三代之内的肿瘤组织基本保持F0代肿瘤的特性。通过连续移植，能够获得大量的来源于同一病人肿瘤组织的PDX小鼠模型，能够进行药物有效性测试、联合用药效果测试、肿瘤标记物测试等试验。

四、君伯生物的技术能力

 君伯生物建有专业SPF小鼠动物设施（SYXK(沪)2018-0003），能够进行包括NSG小鼠在内的各种免疫缺陷小鼠的饲养与荷瘤实验服务。我们拥有多种常见的人肿瘤细胞系，为客户提供全程的荷瘤实验技术服务。同时，我们提供常见细胞系与小鼠的代购服务。