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    2. EZ-TransTM 哺乳动物细胞转染试剂盒

    EZ-TransTM 哺乳动物细胞转染试剂盒

    作者:君伯生物    发布时间:2017-01-10    阅读次数:2195

    使用手册(目录号:KINGBIO-1411)

    1.试剂盒概述:

    本转染试剂盒用于将外源DNA(或RNA)转染至哺乳动物细胞,并在哺乳动物细胞内表达外源目的基因。本试剂盒还提供绿色荧光蛋白GFP表达质粒,用于对转染实验的效率进行检测。


    2. 试剂盒内容:

    (1)EZ-TransTM转染试剂;(1.0ml, -20℃保存)

    (2)GFP表达质粒;(1.0µg/µl , 30µl, -20℃保存,*可以利用流式细胞仪或荧光显微镜检测转染效率)


    本试剂盒不提供,但可能需要:

    Opti-MEM细胞培养液

     

    3. 实验步骤(*按照转染10cm培养皿计算):

    (1)转染前24~48小时,对细胞进行传代,使得转染时细胞密度在50%~70%之间。

    (2)将10µg目的DNA加入到0.5ml Opti-MEM细胞培养液中,小心混匀。

    (3)将50µl EZ-TransTM转染试剂加入到上述含有目的DNA的Opti-MEM细胞培养液中,小心混匀;室温放置10分钟后,加入6ml新鲜培液,小心混匀。

    (4)吸去含有细胞的10cm培养皿的旧培液,小心加入上述6ml含有目的DNA与转染试剂的Opti-MEM细胞培养液。

    (5)放置入细胞培养箱,继续培养4~6小时后,更换旧培液,加入10ml新鲜培液。

    (6)继续培养24~48小时后,收集细胞,用于转染效率检测或后续实验。

     

    4. 不同培养容器参考用量:

     

     

    DNA量

    EZ-TransTM量

    转染时所需培液量

    正常培养时所需培液量

    96孔细胞培养板

    0.2µg

    1µl

    0.12ml

    0.2ml

    24孔细胞培养板

    1µg

    5µl

    0.6ml

    1ml

    12孔细胞培养板

    2µg

    10µl

    1.2ml

    2ml

    6孔细胞培养板

    3µg

    15µl

    1.8ml

    3ml

     

     

     

     

     

    10cm细胞培养皿

    10µg

    50µl

    6ml

    10ml

    15cm细胞培养皿

    30µg

    150µl

    18ml

    30ml

     

     

     

     

     

    25cm细胞培养瓶

    5µg

    25µl

    3ml

    5ml

    75cm细胞培养瓶

    15µg

    75µl

    9ml

    15ml

     

     

    上海君伯生物科技有限公司

    Shanghai Kingbio Biosciences Inc

    • 君伯生物

    • 网址:kingbio-sh.com.cn
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